Di Ambulance Simulator 3D, Anda akan bekerja sebagai sopir ambulans. Tugas Anda adalah mengangkut para korban ke rumah sakit kota. Di depan Anda di layar Anda akan melihat ambulans Anda, yang akan melaju di sepanjang jalan kota secara bertahap menambah kecepatan. Di samping Anda akan melihat peta, di atasnya titik merah akan menandai tempat di mana Anda harus pergi. Anda dengan cekatan menyalip kendaraan yang melaju di jalan raya dan dengan cekatan melewati belokan harus mencapai tempat ini dalam waktu tertentu. Di sana, korban akan dimasukkan ke dalam mobil dan Anda akan membawanya ke rumah sakit terdekat.